生物樣品透射電鏡簡(jiǎn)易制樣步驟
一.取材: 組織塊小于1立方毫米 二.固定: 2.5%戊二醛,磷酸緩沖液配制固定2小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間。 用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次 1%鋨酸固定液固定 2-3小時(shí) 用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次 三.脫水: 50%乙醇 15-20分 70%乙醇 15-20分 90%乙醇 15-20分 90%乙醇 90%丙酮(1:1) 15-20分 90%丙酮 15-20分 以上在4度冰箱內(nèi)進(jìn)行 100%丙酮 室溫 15-20分三次 四.包埋: 純丙酮+包埋液(2:1)室溫 3-4小時(shí) 純丙酮+包埋液(1:2)室溫 過(guò)夜 純包埋液 37度 2-3小時(shí) 五.固化: 37度烘箱內(nèi) 過(guò)夜 45度烘箱內(nèi) 12小時(shí) 60度烘箱內(nèi) 24小時(shí) 六.超薄切片機(jī)切片 50-60 nm 七.3%醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙染色 八.透射電鏡觀察